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實驗室厭氧培養(yǎng)箱的操作步驟

  • 更新日期:2022-02-23      瀏覽次數(shù):1973
    • 安裝
      1.整機應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置,應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備,放置平穩(wěn);
      2.將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當(dāng)位置;
      3.接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合;
      五、使用
      (一)操作室厭氧環(huán)境形成:
      1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
      2.通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度;
      3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);
      4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗;
      5.操作室內(nèi)*次置換(氮氣置換):
      A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
      B.接通氮氣進(jìn)氣路,打開氮氣控制閥1,使手套鼓起,關(guān)閉閥門1,然后扎緊袋口;
      6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。如此連續(xù)三次氮氣置換。
      7.操作室第四次置換(混合氣體置換):
      (混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
      A.調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣;
      B.關(guān)掉混合氣體閥3,并打開閥5,使混合氣體經(jīng)過流量計,調(diào)整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
      C.混合氣體重復(fù)2-3次轉(zhuǎn)換,經(jīng)過上述過程,基本形成厭氧環(huán)境。
      8.操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時后打開美蘭指示紙觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;
      9.開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。
      (二)菌種的置入和培養(yǎng):
      1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊;
      2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;
      3.取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮氣閥2進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥2。第二次重復(fù)操作一次。第三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進(jìn)混合氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;
      4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);
      5.取樣室外門開啟、關(guān)緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;
      6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:
      A.每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示紙觀察,如不正常就重新?lián)Q氣;
      B.要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進(jìn)的氮氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,保證室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;
      C.連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
      D.操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。
      7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。

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